Amount and Phenotype of De Novo Generated Cells in Post-Ischemic Cerebellum of Adult Primates // Количество и фенотип на de novo генерирани клетки в постисхемичен малък мозък на възрастни примати

Abstract

Целта на настоящото проучването беше да установим промени в клетъчната пролиферация чрез BrdU, индикатор за ДНК синтеза, при новородени, едногодишни и полово зрели маймуни (Macaca fuscata) след глобална мозъчна исхемия на малкия мозък. Според възрастта, схемата на приложение на BrdU и срока на преживяемост след исхемията животните бяха разпределени в няколко групи. Установи се, че с увеличаване на възрастта пролиферативните процеси значително намаляват. Исхемията се оказа стимулиращ пролиферацията фактор в малкия мозък при краткосрочните групи D4(+) и D9(+) на изследваните примати. Този ефект обаче се редуцира с нарастването на преживяемостта след исхемията, като броят на BrdU(+) клетки намалява към края на краткосрочната група D15(+). В дългосрочните групи D23(+) и D44(+) количеството на пролифериращите клетки постепенно се увеличава. Установихме, че глобалната мозъчна исхемия води до по-интензивна клетъчна пролиферация в цереброцеребелума спрямо спиноцеребелума. Повечето от новообразуваните клетки след исхемично увреждане се диференцират в микроглия, астроцити или други неневрогенни клетъчни типове. Имаме единични експериментални доказателства за образуване на нови неврони. Исхемията предизвика изявена дегенерация на клетките на Пуркиние. Транскрипционните фактори Pax2 и Pax6 проявяват специфична локализация в отделните слоеве на кората на малкия мозък и характерна възрастова експресия. Исхемичното увреждане в приложените срокове при възрастните животни не оказва съществен ефект върху експресията на Pax2 и Pax6. Получените данни ще допълнят и разширят разбирането за възстановителните процеси след исхемично увреждане на малкия мозък при изследваните примати.

The aim of the present study is to determine changes in cellular proliferation by BrdU, indicator of DNA synthesis, in the cerebellum of new-born, one year old and adult monkeys (Macaca fuscata) after global brain ischemia. According to the age, BrdU paradigm and survival period after ischemia (4, 9, 15, 23 and 44 days) the animals are distributed in several groups. It has been found that with increasing age, proliferation processes have significantly decreased. Ischemia is a proliferation-stimulating factor in the small brain in the short-term D4 (+) and D9 (+) groups of the investigated primates. This effect, however, is reduced with the increase in survival after ischemia, with the number of BrdU (+) cells decreasing towards the end of the short-term group D15 (+). In the long-term groups D23 (+) and D44 (+), the amount of proliferating cells progressively increases. We have found that global cerebral ischemia leads to more intense cell proliferation in cerebrocerebellum compare to spinocerebellum. Most of the newly formed cells after ischemic injury differentiate into microglia, astrocytes or other non-neurogenic cell types. We have single experimental evidence for the formation of new neurons. Ischemia caused a marked degeneration of the Purkinie cells. The transcription factors Pax2 and Pax6 exhibit specific localization in the layers of the cerebral cortex and characteristic age expression. Ischemic damage at the applied time in adult animals does not have a significant effect on the expression of Pax2 and Pax6. Data acquired may expand and enlarge the understanding about restorative processes after ischemic injury to the cerebellum in the primates examined.