Synthesis and Biological Evaluation of SMAC-NT Peptide Conjugates with Combined Antineoplastic and Analgesic Effect // Синтез и биологична оценка на пептидни конюгати SMAC-NT с комбинирано антинеопластично и аналгетично действие

Abstract

The rapidly increasing number of patients with neoplastic diseases and the high mortality rate among them put scientists and pharmacists in a situation of need for the development of a new, adequate treatment. In search for dual-acting pharmacologic agents, apoptotic and analgesic, have been synthesized with high purity (proven by RP-HPLC and CE) and a total of 20 compounds have been characterized, 12 of which are new, not described in literature. All new peptide analogues are characterized by ESI-MS and a specific optical rotation angle. The hydrolytic stability of selected molecules under physiological conditions and after storage was investigated. The native NT (8-13) moiety exhibits low hydrolytic stability and confirms the need for the development of new, more stable analogs. The stability of the newly synthesized NT analogs at pH = 2.0 is higher than that of the native fragment. The rate of hydrolysis increases with increasing pH and the synthesized NT analogs are sensitive to hydrolytic decomposition at pH = 7.4 and pH = 9.0. Initial screening for analgesic activity revealed that the native neurotensin fragment reduced pain sensitivity by 40%, compared to the control group. Compound T3 showed a statistically significant reduction in the number of abdominal spasms in a peripheral pain model (42%; p <0.05). Through the course of work, knowledge has been obtained, which has the potential to be applied in subsequent, up to date studies in the field of AVPI mimetics and NT mimetics.

Бързо нарастващия брой на пациентите с неопластични заболявания и високия процент смъртност сред тях поставят учените и фармацията в ситуация на нужда от разработване на ново, адекватно лечение. В търсене на фармакологични средства с двойно действие – апоптотично и аналгетично са синтезирани с висока чистота (доказана чрез RP-HPLC и CE) и охарактеризирани общо 20 съединения, от които 12 са нови, неописани в литературата. Всички нови пептидни аналози са охарактеризирани чрез ESI-MS и специфичен ъгъл на оптично въртене. Изследвана е хидролитичната стабилност на подбрани молекули при физиологични условия и след съхранение. Нативният NT (8-13) фрагмент показва ниска хидролитична стабилност и потвърждава необходимостта от разработването на нови, по-стабилни аналози. Стабилността на новосинтезираните NT-аналози при рН=2.0 е по-висока от тази на нативния фрагмент. Скоростта на хидролиза се увеличава с нарастване на рН и синтезираните NT аналози, са чувствителни на хидролитично разпадане при стойности на pH=7.4 и pH=9.0. От проведения първоначален скрининг за аналгетична активност се установи, че нативният фрагмент на невротензин понижава болковата сетивност с 40%, спрямо контролната група. При съединение Т3 се наблюдава статистически значимо редуциране в броя на абдоминалните спазми при модел на периферна болка (42%; p<0,05). В процеса на работа са натрупани знания, които са с потенциал за приложение в последващи, надграждащи проучвания в областта на AVPI-миметиците и NT-миметиците.